* * * * 医学微生物学实验 （EXPERMENT OF MICROBIOLOGY） 病原生物学教研室 实验 5 厌氧细菌和白喉杆菌 实验目的： 了解厌氧菌的培养方法及其常用培养基介绍. 熟悉常见厌氧菌的形态结构特征和厌氧培养基内生长现象. 熟悉白喉杆菌的形态结构特征. 实验内容： 厌氧培养方法介绍和厌氧培养示教. 常见厌氧菌的形态结构观察. 厌氧培养基上厌氧菌的生长现象观察. Albert染色观察白喉杆菌形态结构. 1. 厌氧培养方法介绍及保险粉法厌氧培养示教 （1）化学法： 保险粉法: Na2S2O4+2NaHCO3+O2=2CO2+Na2SO4+Na2SO3+H2O 产气袋法： KBH4+H2O H2+O2 H2O 焦性没食子酸法： 焦性没食子酸法+碱液+O2 焦性没食子橙 （2）物理法： 抽气换气法 （3）生物法： 如庖肉培养基（肉汤+肉渣+凡士林密封） 不饱和脂肪酸、还原性谷胱甘肽 钯 2.常见厌氧菌的形态结构观察（示教镜） 破伤风梭菌的芽胞：正圆形、比菌体大，位于菌体末端（特殊染色，x1000） 产气荚膜杆菌粗大的菌体和宽厚荚膜（负染，x1000） 双岐杆菌：G+b，有时有分支生长（G’S，x1000） 庖肉培养基: 肉汤 肉渣 凡士林 牛奶培养基:ph6.8 牛奶( 糖 、蛋白……） 石蕊(pH指示剂5,红色;5-8,紫色; 8,蓝色) 凡士林. 3.厌氧培养基上厌氧菌的生长现象观察 “汹涌发酵”现象：分解糖产酸产气。产酸使蛋白凝固，产气使凝固蛋白被冲成蜂窝状，凡士林被推向试管口；酸使石蕊呈红色 / 产气荚膜梭菌 / 肉汤混浊，肉渣消化，产生气体 破伤风梭菌 石蕊牛奶培养基 庖肉培养基 4.Albert染色观察白喉杆菌形态结构 吕氏血清斜面培养基--白喉杆菌 （1）制片：涂片—干燥—固定 （2）Albert染色步骤： 染液A： 3-5 min. 染液B： 1 min （3）油镜观察：形态，排列1xbet体育，异染颗粒. 典型排列呈L, V 型或栅栏状，一端或两端有比菌体染色深的异染颗粒。 实验报告 绘图描述白喉杆菌Albert染色结果 谢谢!
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